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基于新型納米纖維的LentiHERO在LVV和HSV純化工藝中的應用

溶瘤病毒如單純皰疹病毒（HSV）和痘苗病毒因能在腫瘤細胞中選擇性復制，誘導腫瘤細胞溶解和觸發(fā)免疫應答的能力，而在癌癥治療領域中逐漸受到重視。同樣，慢病毒載體（LVV），如伽利略病毒（GalV）和VSV-G能夠通過實現細胞類型特異性轉導來增強基因治療效果。這些病毒對下游的純化策略產生了顛覆性影響。 常用于基因治療的病毒載體尺寸示意圖：腺相關病毒AAV、慢病毒LVV、單純皰疹病毒HSV和痘苗病毒VACV 對于這些尺寸較大的病毒載體，傳統的基于瓊脂糖的層析方法在工藝放大、產量提升以及雜質（如HCP等）去除等方面存在局限性。為了解決這些瓶頸問題，Astrea Bioseparations研發(fā)推出的新一代基于納米纖維的層析介質LentiHERO為病毒純化提供了新的思路。相比于傳統的瓊脂糖基質，LentiHERO不論從結合載量、雜質去除還是工藝放大等方面都具有顯著優(yōu)勢。以下研究將從病毒的結合能力、回收率、HCP和dsDNA的去除能力、工藝放大等方面充分評估LentiHERO對不同包膜（VSV-G、4070A、GalV）的LVV假病毒和溶瘤病毒HSV的純化性能。1. LVV生產和純化工藝流程 LentiHERO對VSV-G LVV有更高的結合力與動態(tài)結合載量 下圖是VSV-G LVV樣品在不同流速下通過LentiHERO（LH）與Q膜流穿液的TU和p24檢測結果，LentiHERO對LVV的結合能力顯著高于Q膜。由此表明，LeniHERO在LVV流穿之前能夠處理更大體積的料液。 LentiHERO有更高的動態(tài)結合載量 提升LVV回收率與純度的優(yōu)化方案 如下圖所示，條件優(yōu)化后LVV回收率提升至82%，收獲的病毒滴度＞2E+9 TU/mL，且HCD/HCP去除率＞90%。 LentiHERO®可大幅減少純化的緩沖液體積生產規(guī)模所需的緩沖液體積預估 精氨酸洗脫可以省去洗脫后的稀釋步驟，簡化工藝流程； 低鹽或精氨酸洗脫可顯著減少緩沖液用量并降低處理體積。 使用LentiHERO® 1純化非VSV-G包膜的LVV假病毒 重組慢病毒可以通過不同的包膜蛋白來提高轉導效率和改變特異性，從而直接影響下游純化策略。 不同類型慢病毒在細胞和基因治療中的應用 LentiHERO® 1對LVV的回收率（TU） LentiHERO®成功實現了非VSV-G慢病毒（4047A：100%，GalV：36%）的高效純化。 LentiHERO®具備強大的雜質去除能力，在不影響載體功能的情況下可去除＞98%的HCP及＞87%的dsDNA殘留 2. HSV-1溶瘤病毒生產和純化工藝流程 LentiHERO®純化野生型HSV-1（KOS）的結果 篩選裝置上樣量15ml，測得填料載量為1.5E+10 IU/ml。 感染性HSV回收率為56%，LentiHERO®載量可達9.2E+9 IU/ml，大部分感染性HSV在0.6M NaCl條件下被洗脫。 LentiHERO®純化pBACYAC-HSV-1（KOS）的結果 篩選裝置上樣量20ml，測得填料載量為3E+8 IU/ml。 用0.8M精氨酸洗脫，HSV回收率可達到69%，LentiHERO®載量可達1.4E+8 IU/ml，同時實現高效的雜質去除。 結論 ? LentiHERO®弱陰離子納米纖維層析技術可廣泛應用于多種病毒載體的純化，包括不同包膜的慢病毒（4070A，VSV-G，GalV），溶瘤病毒HSV-1； ? LentiHERO®純化病毒具有高回收率：4070A: 100%，VSV-G: 82%，GalV: 36%，HSV-1: 69% ? LentiHERO®具有高效的宿主蛋白去除效率：HCP去除率＞97% ? LentiHERO®可放大形成平臺工藝，適用于工業(yè)化生產 ? LentiHERO®具備拓展應用于其他病毒載體的潛力，如腺病毒，痘苗病毒及病毒樣顆粒（VLPs）等 ? LentiHERO®支持基因治療及溶瘤病毒生產工藝的優(yōu)化 產品信息 貨號 品名 規(guī)格 NL100100 Nereus LentiHERO 2 unit pack（離心管形式） LH0001001A LentiHERO® 1 1 mL（層析柱形式） LH0010001B LentiHERO® 10 10 mL（層析柱形式） LH0010001C LentiHERO® 100 100 mL（層析柱形式） 如您對上述產品感興趣，歡迎點擊這里填寫信息，Astrea Bioseparations技術專家將為您提供個性化優(yōu)化方案，切實幫您解決純化工藝中的疑難問題。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學，擁有超過30年層析介質研發(fā)和生產經驗，是世界級層析介質產品與服務供應商。目前使用Astrea的產品已有超過21個生產工藝通過了FDA和EMA的批準。Astrea Bioseparations在全球擁有3個研發(fā)和生產基地，專注為生物大分子和CGT領域提供行業(yè)領先的層析介質和技術服務。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術，解決了傳統生物分離工具載量低和工藝耗時問題，實現更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程，完全符合當今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國區代理，為用戶提供完善的技術支持與售后服務。歡迎隨時撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網站www_xmjsci_com.vuitimig.com了解更多信息。 更多>

新品上市！Cygnus 重組胰蛋白酶殘留檢測試劑盒

胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，能特異性識別并切割細胞表面粘附蛋白中的精氨酸-賴氨酸（Arg-Lys）肽鍵。在細胞疫苗生產和基因治療細胞培養(yǎng)中發(fā)揮著關鍵作用，被廣泛應用于解離HEK293、Vero等貼壁細胞，使其從培養(yǎng)容器表面高效分離。然而，成品中殘留的重組胰蛋白酶不僅可能影響工藝效率和產品完整性，更潛藏著安全風險。對此，中國藥典（2025）制定了明確的監(jiān)管要求：在生物制品通則<生物制品生產用原材料及輔料質量控制>中將非動物來源蛋白水解酶列為中等風險原料；同時，<人用基因治療制品總論>中規(guī)定應對潛在的工藝相關雜質進行鑒定、評估，并進行定性和（或）定量分析。為精準監(jiān)測并控制這一關鍵殘留雜質，Cygnus Technologies推出全新rTrypsin ELISA檢測試劑盒。該試劑盒基于雙抗夾心法原理，操作簡便。在試劑盒開發(fā)時使用重組豬胰蛋白酶制備抗體，并經過嚴格的抗原親和純化，從而確保了抗體對目標分子的高度特異性。因此，本試劑盒成為理想的工藝開發(fā)工具，可用于優(yōu)化重組胰蛋白酶的去除效率，并用于常規(guī)質量控制和產品放行檢測，助力產品滿足法規(guī)要求。。rTrypsin ELISA Kit 貨號F1080產品性能：超高靈敏度：檢測下限~0.05 ng/mL 定量下限~0.31 ng/mL優(yōu)異精密度：批內與批間CV均 <10% Cygnus Technologies, LLC.為生物技術和生物制藥行業(yè)提供產品和分析方法，旨在加速研發(fā)階段和提高產品質量。Cygnus開發(fā)和生產的生物工藝殘留試劑盒，用于檢測超過50種不同表達系統的特異性雜質。Cygnus作為專注于生物技術應用免疫檢測的高靈敏度分析技術的專家，Cygnus的產品和服務已經被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國總代理，與國內眾多知名藥企，CRO/CMO企業(yè)建立了長久穩(wěn)定的合作關系。多年來西美杰的產品及服務幫助許多企業(yè)加速R&D階段，提高藥物質量、純度和安全，加速優(yōu)化研發(fā)工藝，減少產品上市時間，降低QC成本。如您對上述產品感興趣，歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網站www_xmjsci_com.vuitimig.com了解更多信息。 更多>

Pfanstiehl 喜獲第18個CDE登記號-甘氨酸Glycine G-140

“熱烈祝賀Pfanstiehl的注射級甘氨酸Glycine（G-140）喜獲CDE登記號F20250000403， 這是Pfanstiehl產品獲得的第18個CDE登記號！”甘氨酸在醫(yī)藥輔料制劑中應用廣泛，, 可作為緩沖劑，增溶劑，穩(wěn)定劑等，具有諸多優(yōu)勢。Pfanstiehl秉承一貫高品質理念，為滿足全球生物制藥行業(yè)對于高品質甘氨酸的需求，隆重推出的注射級甘氨酸Glycine (G-140), 具有超高純度，超低內毒素，超低金屬殘留的特點，單獨檢測29種金屬離子，并且新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶和脂肪酶，亞硝酸鹽等多項質量指標的檢測，符合多國藥典規(guī)定（USP, EP, BP, JPE, ChP），可用于生物治療性藥物和疫苗的生產。產品信息：· 產品名稱:Glycine, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, USP, EP, BP, JPE, ChP (G-140)· 中文名稱：甘氨酸· 分子式：C2H5NO2· 分子量：75.07 g / mol· CAS號：56-40-6· 產品貨號：G-140產品特點： · 超高純度，超低內毒素，超低微生物含量，超低金屬雜質殘留· 質量指標新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶，脂肪酶和亞硝酸鹽檢測· 符合多國藥典：USP, EP, BP, JPE, ChP· 符合ICH Q3D標準· 符合GMP標準· 已獲DMF和CDE登記號 產品應用：· 緩沖劑· 穩(wěn)定劑· 增溶劑如果您對Pfanstiehl注射級別Glycine G-140感興趣，歡迎聯系Pfanstiehl 中國區代理商北京西美杰科技有限公司獲得如下詳細的產品概況說明文件和測試樣品。Pfanstiehl Inc.最新產品系列如下，歡迎聯系北京西美杰科技有限公司獲取100g裝免費樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國代理，為客戶提供完善的技術支持與售后服務。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網站www_xmjsci_com.vuitimig.com了解更多信息。 更多>

SeraCare?KPL高性價比ELISA底物

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL（以下簡稱KPL）是全球知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統生產商，擁有40余年的產品研發(fā)經驗，獲得ISO 13485質量體系認證，產品批間穩(wěn)定，品質可靠，深受廣大診斷企業(yè)喜愛和好評。KPL旗下產品線包含高性價比二抗、底物顯色試劑及免疫輔助試劑等，廣泛應用于免疫學研究、診斷試劑開發(fā)及臨床檢測等領域。 KPL高性價比底物及通用試劑廣泛應用于酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、免疫印跡(WB)、免疫組化(IHC)和酶聯免疫斑點(ELISpot)等實驗。本文將重點介紹KPL高性價比ELISA底物系列產品。 在ELISA檢測中，3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）憑借其高靈敏度、強吸光性、操作簡便性、安全性以及廣泛的兼容性，成為辣根過氧化物酶（HRP）顯色檢測的首選底物。KPL公司開發(fā)的SureBlue?TMB是普通TMB底物的優(yōu)化版本，擁有超過30年的應用歷史，具備更高的靈敏度、穩(wěn)定的質量、低批間差異以及無致癌性等特性。SureBlue Reserve?TMB是SureBlue?TMB的進一步優(yōu)化版本，其檢測靈敏度較SureBlue?TMB提高了50%，且為水基底物，不含DMF或DMSO，采用即用型單組分配方，操作便捷，有效期長達24個月。 產品名稱 貨號 規(guī)格 反應酶 靈敏度 SureBlue Reserve? TMB 1-Component Microwell Peroxidase Substrate 5120-00815120-00825120-0083 100 mL 400 mL 1000 mL HRP 5*10-16 SureBlue? TMB 1-Component Microwell Peroxidase Substrate 5120-0075 5120-00765120-00775120-0078 100 mL 100 mL 1000 mL 5000 mL HRP 10-15 TMB 2-ComponentMicrowell Peroxidase Substrate Kit 5120-00535120-00475120-0050 200 mL 600 mL 2700 mL HRP 5*10-15 ABTS&reg;是一種通用型底物，含有2,2'-聯氮基-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)。它提供較寬的工作范圍，適合在需要低背景和中等靈敏度的場景中使用。在辣根過氧化物酶標記的偶聯物存在下，ABTS在405至410 nm顯藍綠色，且反應停止后顏色保持不變。它推薦用于ELISA應用，有單組分和雙組分兩種形式可供選擇。 產品名稱 貨號 規(guī)格 反應酶 靈敏度 ABTS&reg; 1-Component Microwell Peroxidase Substrate Kit 5120-00465120-00415120-0043 100 mL 6x100 mL 1000 mL HRP 10-13 ABTS&reg; 2-Component Microwell Peroxidase Substrate Kit 5120-00325120-0033 6x10 mL 6x450 mL HRP 10-13 BluePhos&reg;是一種專為堿性磷酸酶標記偶聯物設計的底物，是 4-硝基苯磷酸二鈉(pNPP) 的高效替代品，作為可溶性的專利 BCIP 形式，它提供更高的靈敏度、更寬的工作范圍、更低的背景信號和更高的使用便利性。該底物采用雙組分形式，混合后即可使用，在微孔板或試管中反應時可產生藍色產物，適用于定性和定量免疫分析，與橙色或黃色底物相比，它能提供更清晰的視覺區分。產品名稱 貨號 規(guī)格 反應酶 靈敏度 BluePhos&reg; Microwell Substrate（2-C) 5120-0061 5120-0059 5120-0060 50 mL 600 mL 2700 mL AP 10-13 LumiGLO&reg;和LumiGLO Reserve?化學發(fā)光底物是一種基于魯米諾的化學發(fā)光底物，專為與辣根過氧化物酶（HRP）標記的報告分子配合使用而設計，LumiGLO Reserve?在信號強度方面進行了改進，比 KPL LumiGLO&reg;和其他競爭產品靈敏度高出20倍以上，LumiGLO&reg;和LumiGLO Reserve? 化學發(fā)光底物專門用于檢測低豐度的蛋白質或來自珍貴樣本的蛋白質。 產品名稱 貨號 規(guī)格 反應酶 靈敏度 LumiGLO Reserve? Chemiluminescent Substrate（3-C) 5430-00505430-00515430-0049 600 cm2 1000 cm2 2400 cm2 HRP 10-15-10-12 LumiGLO&reg; Chemiluminescent Substrate（2-C) 5430-00425430-00405430-0041 60 mL 240 mL 720 mL HRP 10-12 PhosphaGLO? AP和PhosphaGLO Reserve? AP底物均基于二氧雜環(huán)丁烷的化學發(fā)光原理設計，專用于與磷酸酶（AP）標記的報告分子配合使用。其中，PhosphaGLO Reserve? AP底物在信號強度上實現了顯著提升，特別適用于檢測低豐度蛋白質以及珍貴樣本中的目標蛋白質。PhosphaGLO?和PhosphaGLO Reserve? AP系列底物均以穩(wěn)定的單組分溶液形式提供，便于實驗操作，確保實驗結果的穩(wěn)定性和可靠性。實驗結果可通過X光膠片或化學發(fā)光成像儀進行記錄，以獲得永久性記錄。在ELISA實驗中，建議使用化學發(fā)光光度計進行檢測，以實現更高的檢測靈敏度和準確性。 產品名稱 貨號 規(guī)格 反應酶 靈敏度 PhosphaGLO Reserve? AP Substrate（1-C) 5430-00525430-0053 30 mL 100 mL AP 10-15 PhosphaGLO? AP Substrate（1-C) 5430-00545430-0055 30 mL 100 mL AP 10-12 KPL的底物系列產品以其卓越的性能深受科研工作者和診斷試劑生產商的青睞。這些底物具有高靈敏度、批間穩(wěn)定、長有效期、單組分或多組分可選、使用方便、安全環(huán)保且無致癌性等特點，并提供多種規(guī)格以滿足不同需求。KPL還為酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、免疫印跡（WB）、免疫組化（IHC）和酶聯免疫斑點（ELISpot）實驗提供各種輔助試劑，如包被液、封閉液、洗滌液和終止液等。歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網站www_xmjsci_com.vuitimig.com了解更多信息。KPL的底物系列產品憑借其多樣化的選擇和卓越的性能，已成為免疫學研究和診斷試劑開發(fā)領域的首選品牌。 關于LGC·Seracare·KPL品牌 KPL（Kinetic Plasmonics Laboratories）是一家在生物科學領域具有深厚歷史和卓越聲譽的公司。作為世界上較早實現親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一，KPL憑借其在該領域的先驅地位奠定了堅實的發(fā)展基礎。此外，KPL也是世界上較大的二抗和底物顯色系統生產商，擁有近40年的產品研發(fā)經驗，積累了豐富的專業(yè)知識和技術實力。公司通過ISO13485質量體系認證，確保所有產品的批間差小，品質可靠。KPL的產品以高純度、高靈敏度和高信噪比（信號強、背景低）為特點，深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴。2013年，KPL被體外診斷試劑供應商SeraCare收購，進一步鞏固了其在行業(yè)內的領先地位。SeraCare成立于1984年，是全球體外診斷制造商和臨床實驗室的主要合作伙伴，2018年成為LGC集團的一部分。北京西美杰作為LGC·Seracare·KPL品牌的中國區總代理，致力于KPL優(yōu)秀產品的中國推廣，為國內的廣大科研工作者提供優(yōu)質的產品和專業(yè)的服務。 更多>

新品上市 | Alzet給藥泵100ul緩釋6周（Model 1006）

ALZET新推出了Model 1006給藥泵，作為滲透壓給藥泵系列產品線的最新成員，該新型號可實現長達6周的持續(xù)給藥，是目前在100μl規(guī)格Alzet泵中緩釋時間最長的泵。Model 1006 在小劑量、長周期的動物給藥應用中樹立了新的行業(yè)標準。該產品專為臨床前研究設計，能夠精確且穩(wěn)定地輸注包括藥物、激素及其他化合物在內的多種制劑，是適用于需長期維持恒定輸注速率的慢性研究項目的理想解決方案。 1006 Alzet泵優(yōu)勢特點： 6周緩釋給藥——是目前100μl規(guī)格中緩釋時間最長的泵尺寸精巧——適用于小鼠和其他小型動物精確輸注——確保可靠且穩(wěn)定的緩釋速率Alzet 1006泵參數： 給藥體積：100μl 緩釋速率：0.08μl/h 持續(xù)給藥時間：6周 預啟動時間：72h 點擊這里獲取1006 Alzet泵詳細使用指南。 Alzet滲透壓給藥泵產品列表 型號 品名 規(guī)格 1003D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋3天 10個/盒 1007D 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋7天 10個/盒 1002 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋2周 10個/盒 1004 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋4周 10個/盒 1006 植入式膠囊滲透壓泵100ul 緩釋6周  NEW 10個/盒 2001D 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1天 10個/盒 2001 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋1周 10個/盒 2002 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋2周 10個/盒 2004 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋4周 10個/盒 2006 植入式膠囊滲透壓泵200ul 緩釋6周 10個/盒 2ML1 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋1周 10個/盒 2ML2 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋2周 10個/盒 2ML4 植入式膠囊滲透壓泵2000ul 緩釋4周 10個/盒 北京西美杰科技有限公司是Alzet中國一級代理，可為您提供全方位的售前售后技術支持，如果您需要更多Alzet緩釋給藥泵資料，歡迎撥打西美杰全國客服熱線400-050-4006或登錄西美杰官方網站www_xmjsci_com.vuitimig.com查詢訂購。 更多>

HCP ELISA實驗布板優(yōu)化指南：提升數據準確性的關鍵

截至目前，ELISA方法仍是工藝監(jiān)測和產品批次放行中檢測并定量HCP的金標準。Cygnus提供HCP 檢測試劑盒已經超過25年，開發(fā)了許多專利方法生產對HCP具有廣泛反應性的抗體，目前提供超過32種不同的表達平臺的HCP ELISA檢測試劑盒。 Cygnus的ELISA試劑盒使用預包被板，檢測同時加入抗原與檢測抗體進行孵育。HCP檢測實際上相當復雜，主要依賴于能夠對數千種HCP產生反應的HCP抗體，要使 ELISA檢測的結果準確，針對抗原的捕獲和檢測抗體必須都要過量。只有在抗體過量的條件下，才能得到正斜率的劑量曲線，從而實現準確的定量。因此，合理的孔板布局設置是一個很好的開始。Cygnus HCP ELISA檢測基本流程 一、HCP ELISA布板規(guī)范 1. 復孔要求 推薦采用三復孔設計，三個復孔是最有效的做法，可以發(fā)現并去除可能出現的異常值，在完成實驗后做問題排查時能提供更多信息。需要注意的是，如果檢測樣品數量不支持設置三復孔，那么最少要設置雙復孔，沒有復孔的檢測是無效的。如果可以的話，最好對標準品和對照品設置三復孔。 2. 空白對照 不建議設置額外的空白對照，扣除空白對照不會改善實驗結果，甚至還會導致CV值升高。詳情請參考《使用Cygnus ELISA試劑盒該如何設置空白對照？》。 3. 設置陽性對照。 使用處于標準曲線中間濃度范圍的標準品作為陽性對照（低濃度標準品受靈敏度影響較大）。當使用來自HCP標準品的陽性對照時，曲線中間的濃度點通常會提供最多的信息。 4. 設置陰性對照 使用樣品稀釋液作為空白對照，從而評估0濃度標準品與所使用的稀釋液之間是否存在顯著偏差。 5. 設置1-2個額外的HCP對照 可以使用工藝流程中的一個已經過充分表征的在制品樣品作為額外的HCP對照。有富余孔的條件下，設置兩個稀釋度會比只有一個稀釋度效果更好。 6. 使用低結合板優(yōu)化加樣步驟 在向孔板加樣時，最重要的是要思考完成每一步驟需要多長時間，每一步驟的移動方向是什么。對于這種情況，預先將待檢樣品和酶標二抗加入低結合板內，然后再整個轉移到檢測孔板中，這樣能夠大幅減少將樣品添加到檢測板時造成的加樣誤差。 二、ELISA布板示例 樣品布板的最佳方式是將標準品置于板的左側，將對照品（陰性或陽性對照）置于板的右側，同時還要考慮需要設置的復孔數量，樣品稀釋梯度，以及在加樣和洗板時的移動方向。將標準品和質控品分別置于板的兩側，確保可以從孔板的任意一側都能獲取相同的信息。這樣能夠清晰地反映出在加樣時或洗板過程中可能出現的任何操作失誤，而且通過改變這些孔在板內的位置能夠更好地進行問題排查。 三復孔布板推薦示意圖 5個樣品4個稀釋梯度，所有標準品、樣品及對照品都設置三個復孔 雙復孔布板推薦示意圖 4個樣品和加標控制品都設置4稀釋梯度，所有標準品、樣品及對照品都設置雙復孔 未知濃度HCP樣品布板推薦示意圖 4個樣品8個稀釋梯度，以便收集未知HCP水平樣品的大部分信息。 更多布板示例文末獲取。 三、HCP ELISA布板常見問題排查及解決辦法 1. 加樣問題 在HCP ELISA檢測過程中，每2分鐘的靜態(tài)孵育相當于1分鐘的震蕩孵育。也就是說，如果加樣耗費了20分鐘，就相當于最先加入的樣品比最后加入的樣品多孵育了10分鐘。假如震蕩孵育的時間為1個小時，而加樣就花費了20分鐘，那么勢必會導致前后加入的樣品結合效率有差異，結果表現為最先加入的樣品會得到偏高的OD值。因此，加樣的原則是要確保板內所有孔的孵育時間盡可能一致。如果一次需要檢測的樣品數量較多，為了避免在加樣過程耗費太多時間，我們建議先將樣品和酶標抗體加入低結合板中，然后再用排槍快速轉移到檢測板內。實踐證明，這種操作方法可以有效改善因加樣時間差而導致的結果異常問題。 2. 洗板問題 不合理的洗板操作也會導致檢測結果的異常，與加樣操作類似，HCP ELISA洗板需要遵循的核心原則就是交替方向洗板，也就是盡可能確保所有孔的總清洗時間一致。關于洗板操作的注意事項請參考《如何用正確的洗板方法解決ELISA檢測結果漂移的問題？》 四 常見錯誤案例與改進辦法 案例一 加樣緩慢造成的誤差 如果同一個樣品依次從A到H行，按照1到12列方向逐孔緩慢加樣，即使采用了正確的洗板方式，這種加樣方式也會對檢測結果產生影響。以下熱圖示例展示了如果將相同的樣品以緩慢的速度加入孔板會發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 1.000 0.976 0.952 0.928 0.904 0.880 0.856 0.832 0.808 0.784 0.760 0.736 B 0.997 0.973 0.949 0.925 0.901 0.877 0.853 0.829 0.805 0.781 0.757 0.733 C 0.994 0.970 0.946 0.922 0.898 0.874 0.850 0.826 0.802 0.778 0.754 0.730 D 0.991 0.967 0.943 0.919 0.895 0.871 0.847 0.823 0.799 0.775 0.751 0.727 E 0.988 0.964 0.940 0.916 0.892 0.868 0.844 0.820 0.796 0.772 0.748 0.724 F 0.985 0.961 0.937 0.913 0.889 0.865 0.841 0.817 0.793 0.769 0.745 0.721 G 0.982 0.958 0.934 0.910 0.886 0.862 0.838 0.814 0.790 0.766 0.742 0.718 H 0.979 0.955 0.931 0.907 0.883 0.859 0.835 0.811 0.787 0.763 0.739 0.715 改進辦法：預先在低結合板中加入酶標抗體和樣品，之后再用排槍將所有樣品快速轉移到檢測板中進行孵育。這樣可以有效減少不同孔加樣的時間差，確保所有孔的孵育時間盡可能一致，進而降低異常值出現的概率。 案例二 同一個方向洗板造成的誤差 如果4次洗板都是同一個方向加入洗液的話，也會對檢測結果造成影響。以下熱圖示例展示了4次洗板都是用排槍按照1到12列加入洗液可能發(fā)生的情況。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 B 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 C 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 D 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 E 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 F 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 G 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 H 0.670 0.700 0.730 0.760 0.790 0.820 0.850 0.880 0.910 0.940 0.970 1.000 改進辦法：建議采用交替方向的方式洗板，也就是第1和3次洗板與第2和4次洗板要從相反的方向加入洗液。 五 HCP ELISA結果異常案例與問題排查 如下圖所示，該檢測結果樣品復孔之間出現自左向右的降低的趨勢，且孔板右側的陰性對照和陽性對照的OD值都比左側低。通過兩側陽性對照結果不一致可以判定此次實驗是失敗的。此外，左側陰性對照復孔之間OD值的平均差異為0.01，而右側陰性對照的OD值則接近背景水平，因此還需更多信息來進一步判斷問題來自加樣還是洗板。 綜上所述，本次實驗失敗的原因可能為：1、加樣太慢；2、洗板沒有交替方向的操作。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A STD 1 Sample 1 Dilution 1 Sample 3 Dilution 1 Sample 5 Dilution 1 B STD 2 Sample 1 Dilution 2 Sample 3 Dilution 2 Sample 5 Dilution 2 C STD 3 Sample 1 Dilution 3 Sample 3 Dilution 3 Sample 5 Dilution 3 D STD 4 Sample 1 Dilution 4 Sample 3 Dilution 4 Sample 5 Dilution 4 E STD 5 Sample 2 Dilution 1 Sample 4 Dilution 1 Negative Control (Diluent) F STD 6 Sample 2 Dilution 2 Sample 4 Dilution 2 Control Dilution 1(External HCP) G STD 7 Sample 2 Dilution 3 Sample 4 Dilution 3 Control Dilution 2 (External HCP) H STD 8 Sample 2 Dilution 4 Sample 4 Dilution 4 Postive Control (STD 5 repeat) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A 2.500 2.450 2.400 1.200 1.150 1.100 2.000 1.950 1.900 1.700 1.650 1.600 B 1.200 1.150 1.100 0.600 0.550 0.500 1.000 0.950 0.900 0.850 0.800 0.750 C 0.600 0.550 0.500 0.300 0.280 0.260 0.500 0.480 0.460 0.425 0.405 0.385 D 0.300 0.250 0.200 0.150 0.140 0.130 0.250 0.240 0.230 0.212 0.202 0.192 E 0.150 0.130 0.110 1.400 1.350 1.300 0.125 0.115 0.105 0.005 0.005 0.005 F 0.075 0.065 0.055 0.700 0.650 0.600 0.550 0.500 0.450 0.230 0.225 0.220 G 0.038 0.033 0.028 0.350 0.330 0.310 0.290 0.270 0.250 0.115 0.095 0.075 H 0.015 0.010 0.005 0.175 0.165 0.155 0.145 0.135 0.125 0.090 0.080 0.070 總結 ? 在ELISA實驗之前應該合理規(guī)劃孔板布局：優(yōu)化的孔板布局能夠監(jiān)測關鍵性能指標，并在出現問題時更快地進行問題排查。更多布板示例請點擊這里獲取。 ? HCP ELISA的關鍵考慮因素包括：復孔設置、樣品稀釋梯度、加樣和洗板的操作、對照的設置。 ? 用低結合板來優(yōu)化加樣操作，可以最大程度減少OD值的偏差。 ? 切勿使用空白對照，這樣做會提高檢測結果的變異系數。 相關產品推薦： 品名：Sample Treatment Plate （樣品處理板） 貨號：F402 規(guī)格：1 plate Cygnus Technologies, LLC.為生物技術和生物制藥行業(yè)提供產品和分析方法，旨在加速研發(fā)階段和提高產品質量。Cygnus開發(fā)和生產的生物工藝殘留試劑盒，用于檢測超過50種不同表達系統的特異性雜質。Cygnus作為專注于生物技術應用免疫檢測的高靈敏度分析技術的專家，Cygnus的產品和服務已經被幾乎所有主要的生物制藥公司使用超過25年。 北京西美杰科技有限公司作為Cygnus在中國總代理，與國內眾多知名藥企，CRO/CMO企業(yè)建立了長久穩(wěn)定的合作關系。多年來西美杰的產品及服務幫助許多企業(yè)加速R&D階段，提高藥物質量、純度和安全，加速優(yōu)化研發(fā)工藝，減少產品上市時間，降低QC成本。如您對上述產品感興趣，歡迎致電西美杰客服熱線400-050-4006或者登陸網站www_xmjsci_com.vuitimig.com了解更多信息。 更多>

AppliChem低內毒素原料：為降低生物工藝風險保駕護航

西美杰代理PanReac AppliChem 作為擁有百年歷史的歐洲生物化學試劑與制藥原料生產商，專注提供低內毒素原料，可有效降低生物工藝風險。其產品符合 USP、EP、JP、ChP 等多國藥典標準，具備超低內毒素水平、嚴格質量控制及批次一致性，為科研人員、制藥企業(yè)及培養(yǎng)基生產企業(yè)提供可靠支持，助力保障藥品安全性與工藝穩(wěn)定性。 更多>

新品推薦 | 肌肉生長抑制素檢測試劑盒

Immundiagnostik（IDK）德國進口肌肉生長抑制素檢測試劑盒（貨號 KR1012），采用酶聯免疫法，可定量測定人血清、EDTA 血漿中肌肉生長抑制素含量，樣本量僅需 20μl，標準濃度范圍 0.4-32.5ng/ml，96T 規(guī)格滿足實驗需求。該試劑盒適用于骨骼肌生長調控、肌肉減少癥等相關研究，屬科研專用（RUO）。作為 IDK 中國代理，北京西美杰科技提供完善技術支持與售后服務，助力科研人員高效開展實驗。 更多>

星品推薦 | 白蛋白融合蛋白親和層析填料AlbuPure?

白蛋白融合蛋白 白蛋白融合蛋白示意圖（圖片來源于網絡）白蛋白融合蛋白（rHSA Fusion Proteins）是將目的蛋白與白蛋白進行融合表達的蛋白質，可延長目的蛋白在體內的半衰期，在生物醫(yī)藥領域中具有廣泛的應用價值。早在1992年，歐洲科學家就嘗試將白蛋白和CD4蛋白基因融合后在酵母體系中表達，用于HIV的治療。2014年，GSK公司推出一種GLP-1受體激動劑阿必魯肽（Albiglutide），用于治療2型糖尿病，該藥物是將兩個GLP-1串聯后與rHSA融合，具有長效性，僅需每1-2周注射一次，可有效幫助患者管理其血糖水平。2016年，CSL Bering公司Idelvion經FDA批準上市，該產品是凝血因子IX和rHSA的融合蛋白，在血液中半衰期更長，用于治療B型血友病。此外，還有很多其他類型的白蛋白融合蛋白正處于臨床試驗階段，例如，生長因子-rHSA融合蛋白、白介素2-rHSA融合蛋白、抗體片段-rHSA融合蛋白（如scFv-rHSA融合蛋白）、干擾素α-2b-rHSA融合蛋白等。AlbuPure&reg;層析填料 AlbuPure&reg;是Astrea Bioseparations和Albumedix公司合作開發(fā)的白蛋白親和層析填料，填料基架是粒徑均一的高交聯瓊脂糖，配基是合成的三嗪化合物，具體高流速、高動態(tài)結合載量、強化學耐受性等特點，主要用于白蛋白融合蛋白的純化。AlbuPure&reg;的性能參數如下表所示。 AlbuPure&reg;具有卓越的白蛋白融合蛋白結合性能，如圖4所示，研究人員在不同pH值不同流速的上樣條件下，探究了AlbuPure&reg;對scFv-rHSA的動態(tài)結合載量，結果表明，在pH=4.5，240cm/h線性流速下，AlbuPure&reg;對目標融合蛋白的動態(tài)結合載量最佳，10%流穿時，載量高達38.4mg/mL。 圖4. AlbuPure&reg;動態(tài)結合載量研究與Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL類似，AlbuPure&reg;親和層析填料也具有優(yōu)秀的化學穩(wěn)定性，可耐受1M NaOH溶液的清潔，對常見的變性劑、表面活性劑、還原劑等兼容性良好。 在一項研究測試中，研究人員使用酵母體系表達Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白（72kDa），收獲液經澄清后，上樣到裝有AlbuPure&reg;的層析柱中，層析工藝參數如下表所示： 由圖5的層析圖譜和圖6的SDS-PAGE檢測結果可知，AlbuPure&reg;可以高效捕獲Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白，雜質蛋白在上樣時流穿，經過三次不同pH值下的淋洗步驟，可進一步去除少量掛柱的雜質蛋白，目標融合蛋白最后由辛酸鈉洗脫下柱，純度極高。 圖5. AlbuPure&reg;純化Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白的層析圖譜圖6. SDS-PAGE檢測結果 Lane: 1. Load (diluted); Lane 2: FT (neat); Lane 3: post load wash (neat); Lane 4: wash 1 (neat); Lane 5: wash 2 (neat); Lane 6: wash 3 (neat); Lane 7: elution (diluted); Lane 8: elution (10 fold dilution of lane 7); Lane 9: human albumin standard (1µg)AlbuPure&reg;訂購信息 散裝填料 預裝柱 如您對上述產品感興趣，歡迎點擊這里填寫信息，Astrea Bioseparations技術專家將為您提供個性化優(yōu)化方案，切實幫您解決純化工藝中的疑難問題。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學，擁有超過30年層析介質研發(fā)和生產經驗，是世界級層析介質產品與服務供應商。目前使用Astrea的產品已有超過21個生產工藝通過了FDA和EMA的批準。Astrea Bioseparations在全球擁有3個研發(fā)和生產基地，專注為生物大分子和CGT領域提供行業(yè)領先的層析介質和技術服務。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術，解決了傳統生物分離工具載量低和工藝耗時問題，實現更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程，完全符合當今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國區代理，為用戶提供完善的技術支持與售后服務。歡迎隨時撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網站www_xmjsci_com.vuitimig.com了解更多信息。參考文獻 1. 人血清白蛋白融合技術在藥物長效化改造中的應用，生命科學，第27卷，第9期，2015年9月2. R. Raoufinia et al., Overview of Albumin and Its Purification Methods, 2016 3. M. Sanches et al., AlbuCORE: an albumin-based molecular scaffold for multivalent biologics design, 2020 4. Technical User Guide: Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL, Astrea Bioseparations 5. Application Note: Capture and purification of human serum albumin from human source plasma using Mimetic Blue&reg; SA HL P6XL, Astrea Bioseparations 6. Technical User Guide: AlbuPure&reg;, Astrea Bioseparations 7. Technical Note: Capture and purification of recombinant albumin-fusion proteins using AlbuPure&reg;, Astrea Bioseparations 更多>

預算友好，結果可靠 ：KPL 高性價比二抗推薦

西美杰代理的LGC·SeraCare·KPL（以下簡稱KPL）是全球知名親和純化商業(yè)二抗和底物顯色系統生產商，擁有40余年的產品研發(fā)經驗，獲得ISO 13485質量體系認證，產品批間穩(wěn)定，品質可靠，深受廣大診斷企業(yè)喜愛和好評。KPL旗下產品線包含高性價比二抗、底物顯色試劑及免疫輔助試劑等，廣泛應用于免疫學研究、診斷試劑開發(fā)及臨床檢測等領域。本文將重點介紹KPL的二抗系列產品。 KPL-高性價比二抗 種屬齊全：KPL 的二抗覆蓋20 多個物種，主要種屬有：人、兔、小鼠、大鼠、山羊、綿羊、馬、牛、猴、豬、貓、雞、豚鼠、倉鼠等，其中特殊物種二抗有鴨、鹿和白足鼠。 稀釋比高：酶標（HRP/AP）二抗在Western Blot（WB）推薦稀釋比為1:5000~20000；普通熒光（FITC/TRITC）二抗在免疫熒光（IF）/免疫細胞化學（ICC）中推薦稀釋比為1:100；Dylight系列IF/ICC推薦稀釋比為1:100~1000。 亞型豐富：提供多種抗體亞型，包括IgA (α)、IgE (ε)、IgG (γ)、IgM (μ)、Ig (H+L)、IgG (Fc)、IgA+ IgG+IgM等，此外，還有F(ab’)2 Fragments 的二抗，滿足不同檢測需求。 特異性強：制備抗體的抗原、免疫動物都是經過嚴格篩選，得到的抗體經過鹽沉淀、抗原吸附親和純化、多物種血清吸附處理、多重檢測等步驟，顯著降低交叉反應，確保高特異性。 有效期長：所有二抗均為高純度、高信噪比、特異性強，批次穩(wěn)定，有效期長，可穩(wěn)定保存1年以上。 熒光二抗：除了傳統酶標、熒光二抗以外，還有DyLight 系列熒光二抗，該類熒光二抗的熒光亮度更強，靈敏度更高；抗淬滅性更好，發(fā)光更持久，適合熒光拍照。其高信噪比和低背景特性使其在免疫組化（IHC）、流式細胞術、Western Blot、蛋白微陣列、FLISA（熒光聯免疫吸附）等多種檢測平臺中表現出色，且兼容pH 4-10的各種緩沖系統。 KPL的二抗系列產品憑借其卓越的性能和多樣化的選擇，已成為免疫學研究和診斷試劑開發(fā)領域的首選品牌。無論是高性價比的酶標和熒光二抗，還是具有獨特優(yōu)勢的DyLight系列熒光二抗，KPL都能為用戶提供可靠的解決方案，助力科研和診斷工作的順利開展。關于LGC·Seracare·KPL品牌 KPL（Kinetic Plasmonics Laboratories）是一家在生物科學領域具有深厚歷史和卓越聲譽的公司。作為世界上較早實現親和純化二抗商業(yè)化的生物公司之一，KPL憑借其在該領域的先驅地位奠定了堅實的發(fā)展基礎。此外，KPL也是世界較大的二抗和底物顯色系統生產商，擁有近40年的產品研發(fā)經驗，積累了豐富的專業(yè)知識和技術實力。公司通過ISO13485質量體系認證，確保所有產品的批間差小，品質可靠。KPL的產品以高純度、高靈敏度和高信噪比（信號強、背景低）為特點，深受科研人員和診斷企業(yè)的信賴。2013年，KPL被體外診斷試劑供應商SeraCare收購，進一步鞏固了其在行業(yè)內的領先地位。SeraCare成立于1984年，是全球體外診斷制造商和臨床實驗室的主要合作伙伴，2018年成為LGC集團的一部分。 北京西美杰作為LGC·Seracare·KPL品牌的中國區總代理，致力于KPL產品的中國推廣，為國內的廣大科研工作者提供優(yōu)質的產品和專業(yè)的服務。 更多>

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